У експериментах з ланцюговою реакцією полімерази (ПЛР) упаковка реагентів та зразків безпосередньо впливає на точність та безпеку експериментальних результатів. Стандартні процедури упаковки ПЛР повинні суворо дотримуватися принципів стерильності, запобігання забрудненню та чіткого маркування. Конкретні процедури викладені нижче.
1. Підготовка
Перш ніж продовжувати, носіть лабораторне пальто, рукавички та маску для забезпечення чистого середовища (рекомендується чиста лавка або шафа з біобезпеки). Перевірте, чи всі витратні матеріали (наприклад, трубки для центрифуги, ПЛР) не мають забруднення DNase/RNase та використовують автоклавні або фермент - вільні стерилізатори. Реагенти (наприклад, праймери, шаблон ДНК, ферменти тощо) повинні бути аликворовані в окремі флакони, щоб уникнути повторного заморожування - циклів відтавання.
2. Аликвота та маркування
Аликвотаційні реагенти: Використовуйте піпетку для отримання головної суміші, праймерів тощо. У трубки для центрифуги або свердловини для ПЛР відповідно до експериментальних потреб, то точно віддавши кожен об'єм до найближчого мікролітера. Використовуйте одноразові поради з піпетки, щоб уникнути перехрестя - забруднення.
Стандарти маркування: Усі контейнери повинні бути чітко позначені назвою, концентрацією, датою та номером оператора. Для запобігання нерозбірливих маркувань рекомендується водонепроникні етикетки або пряма гравірування.
3. Упаковка та запечатування
Після аликвотації негайно затягніть ковпачки для трубки центрифуги або заклеюють пластини ПЛР (використовуючи тепло - ущільнювальна плівка або спеціалізована клейова плівка) для запобігання витоку. Для тривалого зберігання термінів - рекомендується розмістити упаковку в герметичний мішок і додати десикант (наприклад, силікагельні намистини) для підтримки сухого середовища.
4. Зберігання та транспортування
Після упаковки реагенти ПЛР повинні зберігатися окремо при - 20 градусів (довгий - термін) або 4 градусів (короткостроковий), щоб уникнути коливань температури. Транспорт слід проводити в утепленому контейнері, наповненому подушковим матеріалом, щоб запобігти удару та витоку. Для біологічних зразків необхідні відповідність вимогам щодо упаковки біобезпеки відповідно до ООН 3373 або відповідних правил.
Стандартизовані процедури упаковки ПЛР мають важливе значення для експериментальної надійності. Суворий асептичний контроль та чітке маркування можуть ефективно знизити ризики забруднення та забезпечити точність даних.
